本路線提供紅磡海底隧道收費廣場開往灣仔（告士打道）、金鐘、中環及上環的早晨特別巴士服務，於1991年6月19日起投入服務，初時袛於平日早上繁忙時間提供服務，方便前往港島灣仔及中環上班的九廣東鐵（現稱港鐵東鐵線）轉乘客。初時終點站位於德輔道中門牌102號（詹氏大廈），1992年5月18日起延長至上環（金龍中心）為終站。1998年9月1日中巴專營權結束後，本路線便改由九巴及新巴聯營。

1988年5月，地鐵（即現今港鐵）以荃灣線「彌敦道走廊」於早上繁忙時間過份擠迫，超出每小時75000人次的安全水平為理由，於平日早上0800-0900時段，於指定南行線的車程，實施「繁忙時間附加費」，以圖分流地鐵乘客至其他較早或較遲的時段，在附加費前後時段會同期提供相反優惠予乘客，這個制度到1993年才取消。地鐵實施「繁忙時間附加費」，令當局發現鐵路已出現飽和，尤以早上繁忙時間為甚，最終令導致政府早年限制巴士路線開辦的「公共交通協調政策」被逼放寬，開始容許巴士公司在地下鐵路「彌敦道走廊」開辦平行路線及增加既有路線的班次，以增加運載量，其中於1991年起，更要求巴士公司開辦多條由新界及九龍多個地區直達港島北商業區的晨早巴士路線（以3字頭的三位數字為編號），以舒緩鐵路的壓力。當時九巴獨營的300（已取消）及九巴與中巴聯營的301線（即本路線），就是在此背景下誕生的首批新線。

本路線由於客量龐大，九巴及新巴皆從不同的路線抽調巴士行駛本路線，除了本路線九巴的3輛掛牌車（全為Enviro500 MMC 12米）外，主要抽車的巴士來自九巴1A、27、81、905、935等線，及新巴91、93等線都要派車支援本路線。由於有很多新界東居民會乘坐港鐵到紅磡站轉乘隧巴前往灣仔、金鐘及中環上班，以免卻港鐵多重轉線，加上本路線收費較其他過海路線為低，因此客量甚高，排隊乘車的人龍常常排到暢運道行人天橋上。

自五天工作周普及後，星期六前往灣仔、金鐘及中上環一帶上班的市民，數量比以前明顯減少，而紅磡海底隧道收費廣場前往上述地區，亦有走線相類似的104、115、182等路線可以選擇，因此本路線於星期六的客量十分稀少。為善用資源，運輸署及巴士公司於《2019-2020年度巴士路線計劃》中，建議本路線取消星期六服務，並獲相關地區區議會通過，於2019年8月31日起實施。

香港第四條過海鐵路——港鐵東鐵線（紅磡至金鐘段，又稱過海段），經過前後接近十年的工程，港鐵行政總裁金澤培聯同運輸及房屋局局長陳帆於2022年5月3日的記者招待會中正式宣佈，定於同年5月15日正式通車。東鐵線過海段全面開通後，東鐵線乘客從此不需於紅磡站轉乘過海隧巴往返灣仔北及金鐘，而紅隧收費廣場亦有其他往返灣仔、中環的過海隧道巴士線選擇，預計將導致本路線乘客大量流失，故此巴士公司及運輸署決定於東鐵線過海段通車後翌日（5月16日）停辦本路線（最後服務日期為5月13日），結束接近31年的服務生涯。

於本路線最後服務日（5月13日），新巴特別製作了模仿初代電子路線牌顯示的告別電牌，於本路線的新巴用車上顯示，更安排現任策劃及車務編排主管黃漢中，及駕駛本路線首批車長之一的劉永洪，分別駕駛末二班次（4091／UX167，當日起上掛新巴城巴宣傳東鐵線會展站轉乘優惠的全車身廣告）及終極尾車班次（5818／VZ2106），後者於0946抵達永吉街終站， 巴士路線牌亮出「光榮告別」字樣，眾人隨即舉機拍照，在現場一片拍手歡呼聲中，本路線正式完成歷史任務，功成身退。

值得一提，本路線的紅磡海底隧道收費廣場，根據區議會地區分界，是屬油尖旺區，不過總站與紅磡區相當近，一般市民容易分不清該處是屬油尖旺區還是九龍城區。本路線停辦前，亦是三條現存以九龍市區開出的300系列過海隧道路線之一（另兩條為302、302A線），曾一度是全港班次最頻密的最頻密的過海隧道巴士線之一（班次達2分鐘一班），現時班次仍維持3-5分鐘一班。本路線停辦前，全程收費$9.80，是香港全程收費最便宜的過海隧道專營巴士路線。