本路線提供林錦公路（梧桐寨、白牛石、林村）開往港鐵太和站及大埔中心的晨早巴士服務，前身為1982年3月22日起投入服務的65線，往來大埔墟及嘉道理農場，袛於平日早晚繁忙時間服務，1983年5月2日起配合九廣東鐵（現稱港鐵東鐵線）電氣化至大埔墟改名為65K，並延長為大埔火車站（現稱大埔墟站）往來上村。

本路線主要是輔助64K線，由於下午繁忙時間乘客不多，1988年5月23日起改為只在早上繁忙時間提供服務，2001年9月3日起增派空調巴士行走，同年12月23日改為全空調服務。本路線走線本身與64K及64P線（第一代）重疊，白牛石至較寮下一段的林錦公路沿線亦有專線小巴25K線選擇，沿線前往接駁港鐵的轉乘客多會於太和站轉乘，為善用資源，由2009年10月5日起，總站由大埔墟站縮短至大埔中心，並取消往上村方向之班次。

自從大欖隧道及港鐵西鐵線通車後，錦田公路及林錦公路沿線居民可乘搭接駁大欖隧道轉車站或港鐵錦上路站的巴士路線轉乘途經大欖隧道的跨區線或港鐵來往區外，導致多條由錦田、上村一帶開往大埔的早上繁忙時間特別路線（九巴64K線上村甫至大埔墟站特別班次、第一代64P線及本路線）客量持續偏低。

因此，九巴及運輸署於2014年4月的「元朗區區域性巴士路線重組」（即《2014-2015年度元朗區巴士路線發展計劃》），建議重組64K線的晨早特別班次，包括取消64K線由上村甫往返大埔墟站的早晨特別班次、64P線及本路線，並開辦64S線（上村球場往錦上路站）。同年6月的修訂建議則保留本路線，但縮減班次至三班及改為星期一至五早上提供服務，首站縮短為林錦公路近嘉道理農場開出（即本路線前身65線的總站），不再服務上村至凌雲寺一段的林錦公路。建議最終獲元朗區議會通過，於2014年10月4日起實施有關改動，與原建議不同的是，班次改為星期一至五早上開出四班（現已增至九班車），現時由64K線抽調巴士行走。隨著64K線於2020年8月起，掛牌車陸續上掛Enviro500 MMC 11.3米（E6M），令該款巴士於本路線恆常出現，提升本路線的運載力及有效疏導林錦公路早上登車困難的情況。

隨著林村谷一帶人口不斷增長，途經林錦公路前往大埔區的公共交通工具，於繁忙時間的客量負荷相當重，但因林錦公路未有任何供大型巴士掉頭的設施，故此該處的巴士路線一直未能採用12米或更長的巴士。2018年，運輸署回覆時任大埔區議員（林村谷）陳振哲時透露，擬於近梧桐寨一段設置迴旋處，令12米或更長的巴士可以於該處掉頭，方便現有路線於林錦公路設置的短程特別班次可使用12.8米巴士運作，亦可將現有大埔巴士服務伸延至林錦公路，以擴大服務範圍。梧桐寨迴旋處最終於2023年5月10日正式啟用，運輸署於是聯同九巴及警方進行試路，發現迴旋處以東的一段林錦公路行駛車輛長度達12米的巴士的結果屬可行，因此運輸署建議撤銷該段林錦公路的11米車長限制。加上嘉道理農場一帶並無常住人口，故此本路線由2024年10月14日起，將首站改為林錦公路「梧桐寨（白牛石）」巴士站，以便本路線可使用12米或更長的巴士行走。

值得一提，本路線前身65線的兩邊總站（大埔墟及嘉道理農場）同屬大埔區，屬大埔區區內線，1983年總站延長至上村後變成跨區路線，直至2014年10月路線縮短，再度以嘉道理農場為起點站，再次成為大埔區區內線，成為現時兩條以60系列作編號的常規大埔區區內線之一，亦是三條沒有於路線字頭所代表的行政區域服務的大埔區路線之一（另兩條為第二代64P線及農曆新年特別路線63R線）。